病毒的提纯方案

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方案1：
（NH4)2SO4法:取50ml的鸡胚尿囊液,分别加入50ml饱和(NH4)2SO4,使其终浓度分别为50%饱和度,置4℃过夜。次日把溶液混匀,10000rpm4℃离心30min,沉淀用5mlpH7.4PBS溶解,装入透析袋内,用PBS透析,磁力搅拌器搅拌90min后,置4℃过夜,期间换液4次。用10%BaCl2检测透析液中有无SO2-4,直至检测不出SO2-4为止。取出透析袋内病毒液,-20℃冻存备用。
方案2：
聚乙二醇6000沉淀法:取50ml鸡胚尿囊液,分别加入5g聚乙二醇6000,使其终浓度分别为10%,再加入NaCl,浓度为2.2%。调整pH至7.4,搅拌均匀,4℃过夜沉淀病毒,次日以10000rpm4℃离心30min,少量PBS悬浮沉淀,-20℃冻存备用。
粗提样品的病毒蛋白含量测定和纯度鉴定:紫外分光光度法测定2份粗提样品的OD280和OD260值,计算病毒蛋白含量,并计算OD260/OD280值,以证明样品中是否含有病毒核酸。另外,取样品与已制备好的兔抗禽流感病毒高免血清做琼扩试验,鉴定样品纯度。
真诚的希望与大家共同分享,共同提高!