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[【资源下载】] 大肠杆菌质粒DNA提取方法的优化

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发表于 2007-5-24 10:30:33 | 显示全部楼层 |阅读模式
简化操作流程,缩短提取时间,降低试验对操作者的危害。
方法:该方法去除酚、氯仿等有害试剂,采用LiCl沉革去除质粒制备物中小片段核酸(包括DNA和RNA);工程菌生长至对数期时通过加入氯霉素后不仅方便质粒DNA的提取堪晷!蛋。白质的去除,而且可使质粒的拷贝数进一步增加,提高质粒DNA产量的目的。
结果:实验改进方法所提取的质粒DNA产量高于常规方法,达到20μg/mL。结论:改进方法提取的质粒DNA,其下游的内切酶消化,PCR、重组质粒鉴定、转化大肠杆菌等实验的结果和重复性都令人满意,完全可用于一般的分子生物学研究。

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